什么是革兰氏染色法?其基本原理及操作步骤怎样?

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(1)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 什么是革兰氏染色法?其基本原理操作步骤怎样?

【◆参考答案◆】:1884年,丹麦医生革兰氏(Gram)发明了一种重要的细菌鉴别染色法称革兰氏染色法(Gramstain)。该染色法的步骤是:(1)先用结晶紫液初染;(2)再用碘液媒染(与结晶紫形成不溶于水的复合物);(3)接着用95%乙醇进行脱色;(4)最后再用番红(沙黄)液复染。经过这种染色方法可以将所有细菌基本上区分为两大类:革兰氏阳性细菌(GrampositivebacteriA.:原经(1)(2)步已染上的紫色复合物不被乙醇洗脱仍保持紫色,称革兰氏阳性(G+)。革兰氏阴性细菌(GramnegativebacteriA.:原已染上的紫色复合物易被乙醇洗脱,又变成无色菌体最后则被番红复染而呈红色,称革兰氏阴性(G—)。革兰氏染色反应机理:一般认为,革兰氏阳性细菌细胞壁较厚而紧密,肽聚糖网层次多、交联致密,不含类脂质。当用乙醇脱色时,因失水而引起肽聚糖层网格结构的孔径缩小乃至关闭,阻止了结晶紫—碘复合物的洗脱,故菌体最后仍呈紫色或紫红色;相反,革兰氏阴性细菌因其细胞壁薄,外膜层的类脂含量高,而肽聚糖层薄和交联度差,当乙醇脱色时,外膜层的物质迅速被溶解,通透性增大,结晶紫—碘复合物被抽提洗脱,细胞褪成无色,再经沙黄等红色染料复染,结果阴性菌呈现红色。

(2)【◆题库问题◆】:[多选] 发酵过程中,添加补料的物质大致上分为().
A.补充生产菌体所需的碳源
B.补充生产菌体所需的氮源
C.补充生产菌体所需的微量元素
D.添加诱导物

【◆参考答案◆】:A, B, C, D

(3)【◆题库问题◆】:[单选] 建设工程项目备案范围包括:各类房屋建筑、土木工程、设备安装、()、装饰装修等建设工程。
A.水利水电
B.道路桥梁
C.管道线路敷设
D.公路交通

【◆参考答案◆】:C

(4)【◆题库问题◆】:[填空题] 影响罐头热杀菌的因素有()、()。

【◆参考答案◆】:微生物的耐热性;罐头传热

(5)【◆题库问题◆】:[填空题] 大豆蛋白的溶解度常用()表示。

【◆参考答案◆】:氮溶解指数(NSI)

(6)【◆题库问题◆】:[填空题] 常用于干制品的速化复水处理的方法有()、()、()。

【◆参考答案◆】:压片法;刺孔法;刺孔压片法

(7)【◆题库问题◆】:[单选] 加糖炼乳在冲调后,在杯底发现有白色细小沉淀,俗称“小白点”。主要成分是()
A.碳酸钙
B.草酸钙
C.磷酸钙
D.柠檬酸钙

【◆参考答案◆】:D

(8)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 放线菌、酵母菌和霉菌显微标本片的制作分别可采用哪些方法?各有什么特点?

【◆参考答案◆】:放线菌与细菌的单染色一样,可用石炭酸复红或吕氏美兰等染料着色后,在显微镜下观察其形态。但为了观察放线菌在自然生长状态下的形态特征,可应用各种培养、制片和观察方法,其中印片法、插片法和玻璃纸法是三种常用的方法。观察酵母菌形态可制备水浸片,若加入一滴美兰染色液,还可区别死活细胞(呈兰色的为死细胞,无色的为活细胞),这是因为活细胞具有较强的还原能力,能使无毒性的美蓝从蓝色的氧化型变成无色的还原型。霉菌具有复杂分枝的菌丝体,分基内菌丝和气生菌丝。由气生菌丝分化产生繁殖菌丝,再由繁殖菌丝产生孢子。霉菌菌丝较粗大,制片时容易收缩变形,孢子也容易分散。为了得到清晰、完整、保持自然状态的标本片,常用载片培养法和玻璃纸培养法进行制片观察。

(9)【◆题库问题◆】:[单选] 下列哪种酶能够催化重组DNA在体外进行合成反应?()
A.限制性外切酶
B.DNA连接酶
C.DNA聚合酶
D.碱性磷酸酯酶

【◆参考答案◆】:C

(10)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 工业上常用的酵母菌主要有哪些?它们各有何特性和用途?

【◆参考答案◆】:工业上常用的酵母菌主要有:(1)酿酒酵母(SaccharomycescerevisiaE.主要用途有:用于生产酒精(乙醇)、用于生产白酒和其它饮料酒、用于食品工业生产多种食品、用于医药工业生产各种医药品。(2)卡尔斯伯酵母(Saccharomycescarlsbergensis)主要用途有:用于生产啤酒、生产食用药用和饲料酵母、提取麦角固醇(含量较高)、作为维生素测定菌等。(3)异常汉逊氏酵母(HansenulaanomalA.用途主要有:用于增加食品的味、生产单细胞蛋白、某些药物、制造发酵食品等。(4)假丝酵母(Candidasp.)用途主要有:生产酵母蛋白作为人畜可食的蛋白质、石油发酵脱蜡并制取饲料蛋白、由烷烃发酵生产柠檬酸等有机酸。

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