单细胞分离方法和培养方法分别有哪些？

(1)【◆题库问题◆】：[问答题] 单细胞分离方法和培养方法分别有哪些？

【◆参考答案◆】：
（1）单细胞分离方法：
①机械法：将叶肉组织研碎，经过滤和离心，收集和净化细胞。
②酶法：利用果胶酶、纤维素酶处理植物叶片或其他外植物体，使细胞分离。
③化学法：利用利用化学药剂使细胞分离的方法。
（2）单细胞培养方法：
①看护培养：用一块活跃生长的愈伤组织来促进培养细胞持续分裂和增殖的方法。
②平板培养：将悬浮单细胞与融化的琼脂培养基均匀混合后平铺一薄层在培养皿底上的培养法。
③微室培养：在人工制造的无菌小室中，将一滴悬浮细胞液培养在少量培养基上，使其分裂增殖成细胞团的方法。

(2)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 诱变育种的基本环节有哪些？关键是什么？何故？

【◆参考答案◆】：出发菌株的选择：适合的出发菌株具有特定生产性状的能力或潜力，即菌株是否具有产生特定代谢产物的催化酶系的基因，有效提高育种工作效率。制备单孢子（或单细胞）悬液：诱变育种要求所处理的细胞必须是处于对数生长期同步生长的细胞，并且是均匀状态的单细胞悬液。诱变处理：诱变剂的选择、诱变剂量的选择。

(3)【◆题库问题◆】：[名词解释] 蛋白质工程

【◆参考答案◆】：
是指通过生物技术对蛋白质的分子结构或者对编码蛋白质的基因进行改造，以便获得更合适人类需要的蛋白质产品的技术。

(4)【◆题库问题◆】：[多选] 影响酶促反应的因素可分为（）两大类。
A．可控因素
B．不可控因素
C．特定因素
D．随机因素

【◆参考答案◆】：A, B

(5)【◆题库问题◆】：[名词解释] 载体（vector）

【◆参考答案◆】：
把一个有用的目的DNA片段通过重组DNA技术，送进受体细胞中去进行繁殖和表达的工具叫载体。
（三种最常用的载体是细菌质粒、噬菌体和动植物病毒。）

(6)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 常见的质粒类型有哪些？

【◆参考答案◆】：1）致育因子（F质粒，F–因子，性因子等）：存在于肠细菌属、假单胞菌属、嗜血杆菌、奈瑟氏球菌、链球菌等细菌中，决定性别，与接合作用有关。2）抗性因子（R质粒，R因子）：主要包括抗药性和抗重金属两大类。3）产生抗生素和细菌素的质粒4）致病性质粒——Ti质粒5）降解性质粒只在假单胞菌属中发现6）隐蔽质粒

(7)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 根据突变修复原理紫外线诱变处理菌种时，应注意什么？如何保证细胞均匀的受到诱变剂的处理？

【◆参考答案◆】：一般微生物细胞内都具有光复活酶，所以，微生物紫外线诱变育种应在避光或红光条件下操作。在实际工作中，要得到均匀分散的细胞悬液，通常可用无菌的玻璃珠来打散成团的细胞，然后再用脱脂棉或滤纸过滤。

(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 什么是基因工程？简述基因工程的主要操作步骤。

【◆参考答案◆】：基因工程通常称为重组DNA技术，又称为基因克隆技术或分子克隆技术。它是用人工方法，将外源基因与DNA载体结合，形成重组DNA，然后引入某一受体细胞中，使外源基因复制并产生相应的基因产物，从而获得生物新品种的一种崭新育种技术。

(9)【◆题库问题◆】：[判断题] 发酵工程中发酵液的PH值是一个反映发酵过程的综合指标.
A．正确
B．错误

【◆参考答案◆】：正确

(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 核酸主要包括哪两类，其各自的组成、功能？

【◆参考答案◆】：根据化学组成不同，核酸可分为核糖核酸（简称RNA.和脱氧核糖核酸（简称DNA.。DNA组成：DNA是由两条多聚核苷酸链组成，每一条链由众多核苷酸通过磷酸二酯键连接而成。一个核苷酸由一分子脱氧核糖、1个磷酸基和4种碱基（A．C．G．T）中任一种组合而成。DNA功能：①贮存决定物种的所有蛋白质和RNA结构的全部遗传信息；②策划生物有次序地合成细胞和组织组分的时间和空间；③确定生物生命周期自始至终的活性和确定生物的个性。RNA组成：RNA是单条的多聚核苷酸链，由众多核苷酸通过磷酸二酯键连接而成。一个核苷酸由一分子核糖、1个磷酸基和4种碱基（A．C．G．U）中任一种组合而成。RNA功能：RNA在蛋白质合成过程中起着重要作用，其中转移核糖核酸，简称tRNA，起着携带和转移活化氨基酸的作用；信使核糖核酸，简称mRNA，是合成蛋白质的模板；核糖体的核糖核酸，简称rRNA，是细胞合成蛋白质的主要场所。