根据所学的细胞生物学知识，论述“克隆羊”多利诞生的基本原理和基本的操作过程及主要技术。

(1)【◆题库问题◆】：[问答题] 根据所学的细胞生物学知识，论述“克隆羊”多利诞生的基本原理和基本的操作过程及主要技术。

【◆参考答案◆】：
基本原理：动物高度分化的细胞核具有全套的个体遗传信息，保持着全能性，有发育为完整个体的潜在能力。
基本步骤：
（1）取出一只成年母羊的乳腺上皮细胞，在低血清浓度下进行体外培养。
（2）取出卵细胞供体母羊的卵母细胞进行去核处理。
（3）利用电融合技术使乳腺上皮细胞与去核卵母细胞进行电融合。
（4）将融合细胞在体外培养至囊胚期。
（5）将囊胚移植到母羊的子宫内，使其着床和发育，直至生出小羊。
主要技术：细胞培养；细胞融合；胚胎培养和胚胎移植。

(2)【◆题库问题◆】：[名词解释] model organisms （模式生物）

【◆参考答案◆】：生物学家通过对选定的生物物种进行科学研究，用于揭示某种具有普遍规律的生命现象，此时，这种被选定的生物物种就是模式生物。

(3)【◆题库问题◆】：[名词解释] finite cell line (有限细胞系)

【◆参考答案◆】：在体外的生存期有限即不能长期传代的细胞系。

(4)【◆题库问题◆】：[问答题] 根据所学的细胞生物学知识，论述“克隆羊”多利诞生的基本原理和基本的操作过程及主要技术。

【◆参考答案◆】：
基本原理：动物高度分化的细胞核具有全套的个体遗传信息，保持着全能性，有发育为完整个体的潜在能力。
基本步骤：
（1）取出一只成年母羊的乳腺上皮细胞，在低血清浓度下进行体外培养。
（2）取出卵细胞供体母羊的卵母细胞进行去核处理。
（3）利用电融合技术使乳腺上皮细胞与去核卵母细胞进行电融合。
（4）将融合细胞在体外培养至囊胚期。
（5）将囊胚移植到母羊的子宫内，使其着床和发育，直至生出小羊。
主要技术：细胞培养；细胞融合；胚胎培养和胚胎移植。

(5)【◆题库问题◆】：[名词解释] differential centrifugation （差速离心）

【◆参考答案◆】：利用不同物质沉降速率的差异，在不同离心速度下分离和收集不同颗粒的离心技术。常用于分离细胞匀浆中的各种细胞器。

(6)【◆题库问题◆】：[名词解释] phase-contrast microscope（相差显微镜）

【◆参考答案◆】：将光程差或相位差转换成振幅差，可用于观察活细胞

(7)【◆题库问题◆】：[名词解释] fluorescence resonance energy transfer (荧光共振能量转移)

【◆参考答案◆】：当一个荧光分子（又称为供体分子）的荧光光谱与另一个荧光分子（又称为受体分子）的激发光谱相重叠时，供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光，同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。FRET程度与供、受体分子的空间距离紧密相关，一般为7～10nm时即可发生FRET；随着距离延长，FRET呈显著减弱。

(8)【◆题库问题◆】：[名词解释] Hybridoma（杂交瘤）

【◆参考答案◆】：一种通过融合而形成的杂交细胞，是由正常细胞和具有某种缺陷的肿瘤细胞杂交而获得。

(9)【◆题库问题◆】：[单选] 细胞原代培养实验中，首先应注意的问题是（）
A．无菌操作
B．细胞消化时间
C．添加培养液的量
D．培养液的浓度

【◆参考答案◆】：A

(10)【◆题库问题◆】：[名词解释] 密度梯度离心

【◆参考答案◆】：
是细胞组分通过某些梯度密度溶液离心使得各个成分互相分开的技术.操作时应将要分离细胞组分小心地铺在含有密度不断增加的、形成密度梯度的高溶解性的惰性物质（如蔗糖）溶液的表面。在这种条件下进行离心，不同组分以不同的沉降速率沉降，形成不同的沉淀带，而使不同的组分得以分离。