对于高效液相色谱仪的检测器,除了须具备与气相色谱仪相同的基本要求外,还要特别注意哪两点?为什么?

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(1)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 对于高效液相色谱仪的检测器,除了须具备与气相色谱仪相同的基本要求外,还要特别注意哪两点?为什么?

【◆参考答案◆】:①对流动相的适应:在气相色谱仪中,流动相比较简单,只是少数性质差异不大的气体。但在高效液相色谱仪中,流动相从有机化合物到水及其他电解质溶液都有,特别是加上梯度洗脱之后,流动相本身就成为多元物质,因此在设计及选用检测器时必须充分注意。②峰扩展的问题:在高效液相色谱仪中由于流动相的流速相对较慢,峰扩展的问题显得比气相色谱仪中更为突出。因此,对于死体积及测量系统的时间常数的要求就更为严格。要求检测器的空间及测量系统的时间常数尽可能小。早期样品池体积在50μl左右,现在一般都在10μl以下。

(2)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 气相色谱仪的主要组成部分有哪些,其工作过程如何?

【◆参考答案◆】:气相色谱仪主要由气路系统、进样系统、分离系统(色谱柱)、检测系统、温度控制系统、数据处理、记录系统及电源、电子线路等构成。气源提供的载气减压后,经净化干燥器净化,再通过稳压和稳流环节,以保证得到流动平稳、洁净的载气作流动相,进入色谱柱。当气化室、分离柱、检测器达到操作所需的温度,且载气流量平衡时,将样品由进样器注入,气态样品或经气化室气化了的液态样品被载气带入色谱柱,开始分离过程。由于样品中各组分对两相的分配系数等方面的差异,在色谱柱中经过反复多次吸附-脱附或溶解-析出的分配过程后,依次离开色谱柱,进入检测器。检测器把流入的组分定量地转换成电信号,经放大处理后,送往显示与记录系统,就可得到被测样品各个组分的色谱图。

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] 蛋白质的等电点

【◆参考答案◆】:当溶液的酸碱度处于某一特定pH值时,它将带有相同数量的正、负电荷(即净电荷为零),致使蛋白质分子在电场中不会移动,称此特定的pH值为该蛋白质的等电点。

(4)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 流式细胞仪的基本工作原理是什么?

【◆参考答案◆】:流式细胞仪是以激光为光源,检测生物学颗粒理化性质的仪器。其基本工作原理:(1)仪器将悬浮分散的单细胞悬液,经特异荧光染料染色后,放入样品管。(2)在气体压力的作用下,样品管中的单细胞悬液形成样品流垂直进入流式细胞仪的流动室,并沿轴心向下流动,流动室轴心至外壁的鞘液也向下流动,形成包绕细胞悬液的鞘流液,鞘液和样品流在喷嘴附近组成一个圆柱流束,自喷嘴的圆形孔喷出,与水平方向的激光束垂直相交,相交点即为测量区。(3)染色的细胞受激光照射后发出荧光,同时产生光散射。这些信号分别被呈90°角方向放置的光电倍增管荧光检测器和前向角放置的光电二极管散射光检测器接收,经过转换器转为电子信号,经模/数转换输入计算机。(4)计算机通过相应的软件储存、计算、分析这些数字化信息,就可以得到细胞的大小和活性、核酸含量、酶和抗原的性质等物理和生化指标。

(5)【◆题库问题◆】:[单选] 样品和鞘液管道应用漂白粉液清洗的间隔时间为()。
A.每月
B.每天
C.每季度
D.每周
E.每年

【◆参考答案◆】:D

(6)【◆题库问题◆】:[单选] 下列哪种组成不是荧光显微镜的结构元件()。
A.激发光源
B.二组滤光片
C.二色镜
D.聚光镜
E.环形光阑

【◆参考答案◆】:E

(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] 信号转换器

【◆参考答案◆】:信号转换器亦称换能器,主要是指电化学或光学检测元件。

(8)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 简述POCT的发展方向。

【◆参考答案◆】:(1)为了适应实际需要,理想的POCT仪器应该是结构灵巧、体积小、容易使用、不需要额外人工处理标本、不需要非常精确的加样,结果准确、并能自动保存所有记录的微型移动系统。(2)应用无创性/少创性技术的POCT仪器,目前主要集中在血糖、胆红素、全血细胞、Hb检测方面的应用。(3)生物芯片技术相关的POCT因其具有高灵敏度、分析时间短、同时能检测的项目多等特点,也是POCT发展的一个重要趋势。

(9)【◆题库问题◆】:[单选] 钠电极调整液中含有的成分是()。
A.氟化镧
B.氯化钙
C.氯化钾
D.氟化钠
E.乙酸钠

【◆参考答案◆】:D

(10)【◆题库问题◆】:[单选] 下述免疫电泳优点的描述中,错误的是()。
A.加快了沉淀反应的速度
B.是将某些蛋白组分根据其带电荷的不同而将其分开,再与抗体起反应
C.本法微量化程度高
D.多样化程度高
E.应用范围小

【◆参考答案◆】:E

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