何谓革兰氏染色法？主要操作步骤各有何作用？其中哪一步是成败的关键？为什么？

(1)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 何谓革兰氏染色法？主要操作步骤各有何作用？其中哪一步是成败的关键？为什么？

【◆参考答案◆】：此法由丹麦医生C.Gram于1884年发明的一种重要的细菌鉴别染色法而得名。主要步骤：结晶紫初染，碘液媒染，乙醇脱色和沙黄复染。初染使菌体染上紫色；媒染使结晶紫与碘分子结合成一个分子量大且染色较牢固的复合物；乙醇脱色是使已染上的蓝紫色脱去而又成为无色（若是G+菌则仍为蓝紫色）；复染是使已脱色的细菌再染上复染液的颜色。此法成败的关键是脱色。如果脱色时间过长，G+菌则可被误染为G-菌，反之，G-菌可被误染为G+菌。

(2)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 消毒剂A的石炭酸系数为0.5，消毒剂B的石炭酸系数为5.0，两者与苯酚相比又如何？

【◆参考答案◆】：石炭酸系数为1.0的消毒剂的效力与苯酚相同，石炭酸系数小于1.0的消毒剂的效力比苯酚小，石炭酸系数大于1.0的消毒剂的效力比苯酚大。所以，消毒剂A的效力比苯酚小，消毒剂B的效力比苯酚大。

(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 微生物菌种保藏的原理。

【◆参考答案◆】：选用优良的纯种以及创造与利于微生物休眠的环境条件。

(4)【◆题库问题◆】：[名词解释] 微生物（microorganism）

【◆参考答案◆】：因太小，一般用肉眼看不清楚的生物。这些微小生物包括：无细胞结构不能独立生活的病毒、亚病毒（类病毒、拟病毒、朊病毒）；具原核细胞结构的真细菌、古生菌以及具真核细胞结构的真菌（酵母、霉菌、蕈菌等）、单细胞藻类、原生动物等。但其中也有少数成员是肉眼可见的。

(5)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 比较噬菌体的溶源现象和裂解周期。

【◆参考答案◆】：溶源现象是指温和性噬菌体侵入宿主细胞后，仅以前噬菌体状态存在而不引起宿主细胞裂解的现象。裂解周期又称为裂解性循环，是指每一代烈性噬菌体所经历的繁殖过程。包括吸附、侵入、增殖、成熟和裂解五个阶段。

(6)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 试说明自然界氮素的存在方式及其循环过程，并指出微生物在氮素循环中的作用。

【◆参考答案◆】：存在形式：氮元素在自然界的存在形式主要有铵盐、亚硝酸盐、硝酸盐、有机氮化合物及大气中的氮气。循环过程：生物固氮：大气中氮气是数量最大的氮素贮藏库，但除了雷电、火山爆发及化学固定等产生少量固氮产物外，大部分是生物固氮，其中主要是共生固氮，其次是自生固氮。在生物中，只有少数原核生物及其共生体才可以固氮。硝化作用：氨态氮经化能自养菌氧化成硝酸态氮的过程。硝酸盐同化作用：绿色植物和多数微生物利用硝酸盐作氮源合成有机氮化物。铵盐同化作用：绿色植物和多数微生物利用铵盐合成有机氮化物。氨化作用：有机氮化物经微生物作用产生氨。反硝化作用：硝酸盐被还原为亚硝酸盐，并进一步还原为N2的过程。异化性硝酸盐还原作用：硝酸盐被还原为亚硝酸盐，并进一步还原为NH3的过程。其中生物固氧作用、硝化作用、反硝化作用、氨化作用、异化性硝酸盐还原作用是微生物特有的。氮素循环中其他过程也都有微生物参加，可见微生物在氮素循环中起着关键的作用。（注：也可用图解法回答）

(7)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 结合病毒的特点分析抗病毒药物在设计及应用较为局限的原因。

【◆参考答案◆】：对不进行复制的潜伏病毒无效，如HSV高度变异的病毒易形成耐药毒株，如流感病毒不同病毒复制周期中的具体环节和涉及分子不同，具体落实到可选择的药物太少。

(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 描述磺胺类药物的作用机制。

【◆参考答案◆】：PABA是四氢叶酸的结构组分，人体不含二氢碟酸合成酶、二氢叶酸合成酶及二氢叶酸还原酶，不能利用外界的PABA自行合成四氢叶酸。某些细菌具有二氢碟酸合成酶，可以PABA作生长因子，自行合成四氢叶酸，所以细菌必须由外界提供PABA，方可正常生长。磺胺是对氨基苯甲酸（PABA.的代谢类似物，二者产生竞争性拮抗作用。

(9)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 显微镜直接计数法的局限性是什么？

【◆参考答案◆】：①不能区分死活细胞；②一些小的细胞在显微镜下很难看到，有些细胞也可能被丢失；③很难获得精确的计算；④样品不被染色时，需要相差显微镜；⑤对低浓度悬浮液不适用。细菌悬浮液细胞浓度低于106个时，视野中无菌；⑥计数前须对运动的细胞固定。

(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 什么是细胞病变效应？

【◆参考答案◆】：可见的病毒对感染细胞的影响为细胞病变效应（CPE.。